發(fā)現(xiàn)歷史和命名:

達菲血型是較早發(fā)現(xiàn)的血型系統(tǒng)。1950年，Cusbush等人在一名多次輸血引起溶血反應(yīng)的患者血清中發(fā)現(xiàn)Fya抗體。因為患者姓杜菲，所以新發(fā)現(xiàn)的血型被命名為杜菲血型。一年后，Ikin等人發(fā)現(xiàn)了與Fya抗體相對應(yīng)的Fyb抗體。1995年，國際輸血協(xié)會將達菲血型系統(tǒng)編號為008。Fya抗原和Fyb抗原在出生時已完全發(fā)育，可在妊娠早期6-7周檢測到。達菲血型因其在臨床應(yīng)用中的重要意義而備受關(guān)注。最新研究表明，達菲血型不僅與輸血安全和母嬰血型不合引起的新生兒溶血病有關(guān)，達菲抗原還可以作為趨化因子在人瘧原蟲受體、炎癥、腫瘤、移植排斥等方面發(fā)揮作用。

1.達菲血型系統(tǒng)抗原表達和基因結(jié)構(gòu)特征

達菲血型系統(tǒng)包含六種抗原:Fya、Fyb、Fy3、Fy4、Fy5和Fy6。因為Fy4發(fā)現(xiàn)了相應(yīng)的抗體，所以Fy4沒有確診，只是放入了Duffy抗原討論。Duffy抗原不僅可以在紅細胞上表達，還可以在腦、大腸、內(nèi)皮細胞、肺、脾、甲狀腺、胸腺和腎臟的細胞膜上表達，而不能在粒細胞、淋巴細胞、單核細胞、肝臟和胎盤的細胞膜上表達。

達菲血型是位于細胞膜表面的糖蛋白，分子量為35000~50000，是一種趨化因子受體。Fya和Fyb對大多數(shù)蛋白水解酶敏感。經(jīng)木瓜蛋白酶、無花果蛋白酶、菠蘿蛋白酶、鏈霉蛋白酶和胰蛋白酶處理的紅細胞可完全破壞Fya和Fyb抗原。用血清學(xué)方法，Duffy血型可分為四種常見的表型:Fy、Fy、Fy和Fy。

達菲血型蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)示意圖

達菲血型的基因從1q22到23，基因名為DARC，基因產(chǎn)物為fy糖蛋白。Fy抗原基因有兩個外顯子和一個內(nèi)含子?；蛱?532，基因庫注冊號NM-002036，基因克隆于1993年。FyA和FyB受Fya、Fyb和Fy調(diào)節(jié)。FyA和FyB在125位堿基不同，F(xiàn)yA為g，F(xiàn)yB為a，導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄的mRNA在42位氨基酸編碼不同。FyA和FyB基因共顯性，F(xiàn)y基因沉默是突變引起的，基因表型純合，表達為Fy，膜上無Fy糖蛋白。Fy沉默基因和FyB基因基本相同，在T33C突變。突變點位于GATA序列中，即從CTTATCT到CTTACTT。該編碼區(qū)上游的GATA-1的轉(zhuǎn)錄與突變結(jié)合產(chǎn)生純合子，從而阻止Fy糖蛋白肽鏈的合成。這種突變僅在紅系中表達，表明紅細胞中沒有DARC，表達為Fy表型。奇怪的是，非紅細胞系統(tǒng)不受影響，除紅細胞外，所有組織和細胞上的DARC和Fy抗原都能正常表達。

達菲血型基因在1號染色體上的位置

二、達菲血型系統(tǒng)的種群分布特征

顯型

基因型

概率/%

歐洲人

非洲人

日本的

Fy

Fya/FybFya/Fy

20

10

81

Fy

Fya/Fyb

48

三

15

Fy

fyb/fybybb/Fy

32

20

四

Fy

Fy/Fy

0

67

0

歐洲和非洲人種Fy血型的表達頻率明顯高于亞洲日本人，而Fy的表型是沉默基因Fy的純合產(chǎn)物。非洲黑人和美國黑人在FYA和FYB頻率上有差異，但FY基因沉默頻率高于歐洲人，非洲黑人Fy表型在90%以上。中文Fya的表達頻率為99%，而Fyb為9.2%。

瘧原蟲感染的全球流行趨勢

三、達菲血型系統(tǒng)的抗體特征

抗FY抗體大多是免疫產(chǎn)生的，“天然抗體”很少。人血清中的抗Fy抗體多為IgG1。大多是妊娠刺激因子產(chǎn)生的抗Fya，產(chǎn)生抗Fy3還有其他原因。

1.抗Fya是常見的，其中大多數(shù)是免疫抗體，可引起HDN和急性及慢性輸血反應(yīng)。IAT大部分抗Fya抗體陽性，約50%可激活補體C3，通常引起慢性溶血反應(yīng)，但臨床癥狀較輕，部分可引起嚴重急性溶血反應(yīng)。

2.抗Fyb很少見，產(chǎn)生抗Fyb的概率只有抗Fya的1/20，是一種罕見的抗體?？笷yb，通常是IgG1，可以通過HDN和輸血產(chǎn)生。大多數(shù)抗Fyb IAT抗體呈明顯陽性，部分抗Fyb抗體在生理鹽水中可發(fā)生反應(yīng)?？笷yb的溶血反應(yīng)一般比較嚴重，抗Fyb結(jié)合補體。

3.抗Fy3罕見，常出現(xiàn)在Fy表型血漿中，但不與Fy紅細胞反應(yīng)，但與Fy、Fy和Fy紅細胞反應(yīng)?？笷y3可因HDN和輸血而產(chǎn)生，抗Fy3的性質(zhì)具有抗Fy1和抗Fy2的共性。紅細胞的Fya抗原和Fyb抗原經(jīng)蛋白酶處理破壞后，不再與抗Fya和Fyb反應(yīng)，但仍與抗Fy3反應(yīng)。抗Fy3引起的HDN和輸血反應(yīng)一般都很嚴重。

4.抗Fy5也是一種罕見的抗體，類似于抗Fy3?？笷y5不與RHnull細胞、RHnullFy3陽性紅細胞和黑色Fy紅細胞反應(yīng)。而抗Fy3不與RH反應(yīng)，但與RHnullFy3反應(yīng)，不與Fy反應(yīng)。

5.抗Fy6是一種小鼠單克隆抗體。它與Fya抗原和Fyb抗原反應(yīng)，但不與Fy紅細胞反應(yīng)?？笷y6識別Fya抗原和Fyb抗原共有的高頻抗原位點片段。

四、杜飛血型系統(tǒng)檢測方法

檢測達菲血型的方法有很多，如血清學(xué)表型檢測、基因檢測、功能檢測等。Fya和Fyb對大部分蛋白水解酶敏感，因此Duffy血型抗原不能用酶法檢測，可以用間接抗球蛋白和其他具有相應(yīng)血清抗體的促凝介質(zhì)實驗進行鑒定。此外，用Fya、Fyb、Fy6和Fy3單克隆抗體通過流式細胞術(shù)分析其Duffy血型抗原，并估計紅細胞上Duffy抗原位點的數(shù)量。達菲抗原數(shù)量的變化也可以通過用從紅細胞膜分離的糖蛋白進行免疫印跡來檢測?；趯_菲血型基因結(jié)構(gòu)中FYA、FYB和FY等位基因堿基變化的認識，設(shè)計了一種基于聚合酶鏈反應(yīng)的分子生物學(xué)技術(shù)來判斷其基因型。常用的基因檢測方法是PCR-SSP，可以用4個特異性引物對Duffy基因進行分型。達菲基因型的聚合酶鏈反應(yīng)-過磷酸鈣法雖然簡單，但FYA等位基因和FYB等位基因的特異性引物只相差一個堿基，因此特異性擴增產(chǎn)物容易出現(xiàn)假陽性。聚合酶鏈反應(yīng)-RFLP檢測達菲血型基因也存在這些問題，很難同時檢測fyA、FYB和FY基因型。解決上述問題的最佳途徑是建立達菲血型基因的DNA基因測序技術(shù)，通過對達菲基因編碼區(qū)和基因啟動子區(qū)的序列進行測序，準確了解達菲血型基因的結(jié)構(gòu)。

5.達菲血型的生物學(xué)功能及臨床意義

1.間日瘧原蟲裂殖子是間日瘧原蟲的受體，其表面有達菲結(jié)合蛋白，該蛋白與DARC蛋白結(jié)合，然后侵入紅細胞。然而，由于缺乏DARC，F(xiàn)y表型紅細胞沒有被瘧原蟲感染。

瘧原蟲生命周期

2.Fy抗原與自身免疫性疾病在一些自身免疫性疾病如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中，F(xiàn)y抗原的表達增加。

3.Fy抗原和哮喘Fy抗原及趨化受體CCR5和CXCR1參與肺移植免疫排斥反應(yīng)，介導(dǎo)肺細胞損傷。

4.DARC是一種異源趨化因子受體，可能是HIV-1受體。作為受體清除劑，DARC具有結(jié)合白介素-8和促進腫瘤血管生成的能力。DARC的正常表達在炎癥反應(yīng)中調(diào)節(jié)白細胞遷移中起重要作用。DARC也與移植排斥有關(guān)。

5.Fya和Fyb對輸血和HDNFya、Fyb抗原有中度免疫，其抗體可由多胎妊娠引起，但多為輸血產(chǎn)生，其抗體可引起急慢性輸血溶血反應(yīng)。

參考文獻:

1.張志欽，張力文，謝一平，等.達菲血型系統(tǒng)抗原的研究進展.臨床血液學(xué)雜志，2017，30:327-330。

2.蘇玉清，梁艷蓮，張銀澤，等.杜飛血型研究及臨床應(yīng)用新進展.檢驗醫(yī)學(xué)，2012，30 : 452-455。

3.AABB技術(shù)手冊

-

QQ 1969302766