北京時間7月6日17時，國際學(xué)術(shù)雜志《NATURE COMMUNICATION s》(《自然-通訊》)是中國科學(xué)院廣州生物醫(yī)藥衛(wèi)生研究院裴丹慶和徐曉東研究組關(guān)于JEBRA FISH研究的最新成果《DEFICICS III PI3-

該研究利用斑馬魚突變體模擬了炎癥性腸病的部分表型，并且結(jié)合體外細(xì)胞3D培養(yǎng)結(jié)果解釋其發(fā)病機制。

什么是炎癥性腸病

炎癥性腸病是一類消化系統(tǒng)產(chǎn)生的自身免疫性疾病的總稱，主要包括克羅恩氏病和潰瘍性腸炎等，患者主要集中在北美、北歐以及澳大利亞等西方國家。

2016年，美國的炎癥性腸病患者超過300萬，而國內(nèi)的發(fā)病率為3.3/100,000并且逐年升高。大部分患者遭受了嚴(yán)重的身心折磨，然而目前對其發(fā)病機理的研究尚處于探索階段。

人類疾病研究為什么用斑馬魚

斑馬魚是一種熱帶魚，身體延長而略呈紡錘形，頭小而稍尖，吻較短，全身布滿多條深藍色縱紋，與銀白色或金黃色縱紋相間排列，紋路比較有條理，在水族箱內(nèi)成群游動時猶如奔馳于非洲草原的斑馬群，故此得斑馬魚之美稱。

斑馬魚是腸道發(fā)育和疾病研究的一種理想的模型

斑馬魚早期胚胎體外發(fā)育、產(chǎn)卵量高，和人類基因有著87%的高度同源性，被廣泛用于發(fā)育研究以及藥物篩選。斑馬魚作為模式生物的優(yōu)勢很突出，這意味著其實驗結(jié)果大多數(shù)情況下適用于人體。

用斑馬魚找出腸道炎癥的一個原因

斑馬魚腸道早期發(fā)育與高等動物類似，因此也是炎癥性腸病研究的理想模型之一。本研究利用基因編輯技術(shù)獲得了兩種 PIK3C3突變品系。通過組織學(xué)、分子生物學(xué)以及電鏡檢測，研究人員確定了突變體中腸道炎癥的基本表型。機理方面的研究表明，腸道炎癥反應(yīng)的激活不是微生物以及外界環(huán)境所引起的，而是腸道上皮細(xì)胞自主性損傷從而招募大量的中性粒細(xì)胞所導(dǎo)致的，這是與已知的斑馬魚腸道炎癥模型的最大區(qū)別。

為了確定突變體致死的根本原因是否是免疫系統(tǒng)的缺陷，科研人員決定在培養(yǎng)皿中研究“干凈的腸道”。Caco2 細(xì)胞系是人源結(jié)腸癌細(xì)胞，當(dāng)在培養(yǎng)皿底部鋪一層 Matrigel 時，5天以后就能形成類似腸腔的“甜甜圈”結(jié)構(gòu)。在該體系下抑制 PIK3C3 的表達，也會導(dǎo)致細(xì)胞連接的破壞。體外模型進一步證明，上皮結(jié)構(gòu)的破壞是上皮細(xì)胞自主性的。

突變體腸道上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)紊亂，有細(xì)胞脫落

此外，研究團隊利用斑馬魚發(fā)現(xiàn)了多個囊泡運輸?shù)鞍自谠缙诎l(fā)育過程中的作用。PIK3C3也通過其催化產(chǎn)物磷酸肌醇 3-磷酸（PI3P）調(diào)控體內(nèi)的囊泡運輸?shù)冗^程。

PI3P缺失導(dǎo)致上皮細(xì)胞連接破壞，最終招募中性粒細(xì)胞，發(fā)生急性炎癥

未來的應(yīng)用

本研究既完善了磷酸肌醇（PI）代謝產(chǎn)物在腸道炎癥方面的作用，也為炎癥腸病的藥物篩選提供了新的平臺。目前，僅有部分藥物能夠緩解腸道炎癥癥狀，使得患者進入緩解期。本研究中的腸道自主性炎癥模型對藥物靶點的篩選具有推動作用。

廣州生物院-中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)聯(lián)合培養(yǎng)博士生趙紹陽和廣州生物院夏建紅為論文共同第一作者，裴端卿研究員和舒曉東研究員為通訊作者。本研究得到了國家自然科學(xué)基金、國家重大科學(xué)研究計劃、中國科學(xué)院戰(zhàn)略性先導(dǎo)科技專項及廣東省科技計劃項目等經(jīng)費資助。