目前，分析液相色譜柱多為硅膠基質(zhì)柱，細分為:

高純硅膠柱:以高純二氧化硅為填料，用途廣泛，但只能在PH2.0-7.5，小于60度的條件下使用。由于強極性硅羥基(Si-OH)的強二次保留效應(yīng)，其應(yīng)用受到限制，已被鍵合相柱取代。

反相硅膠柱是以硅烷化硅膠為基質(zhì)，表面鍵合弱極性官能團的固定相。目前廣泛使用的有C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(苯基)。它用于分離大多數(shù)有機化合物，應(yīng)用范圍最廣。

正相硅膠柱:是以硅烷化硅膠為基質(zhì)，表面鍵合極性官能團的固定相。目前較多的是NH2—(氨基)、CN—(氰基)、DIOL(二羥基，也常稱為HILIC，用來分離有機酸和蛋白質(zhì)等。).它們主要用于分離旋光異構(gòu)體和極性相對較大的物質(zhì)，這些物質(zhì)不能用反相柱分離。

離子交換柱:是以硅烷化硅膠為基質(zhì)，通過磺化作用鍵合強陽離子/陰離子基團(磺酸鹽/季銨堿)的固定相，分為強酸性、強堿性、弱酸性、弱堿性等不同規(guī)格。用于分離溶解性強的有機鹽化合物。(注意:不要和離子色譜混淆。離子色譜主要分離無機鹽化合物或一些點狀離子。)

2聚合物基質(zhì)柱

聚合物基質(zhì)柱是指以聚苯乙烯-二乙烯苯、聚甲基丙烯酸酯、多孔微球蛋白等聚合物凝膠為主要填料的色譜柱。與硅膠柱相比，它具有更強的疏水性和更寬的酸堿度范圍(1.0 ~ 14.0)，但其柱效較低，因此主要用于凝膠滲透色譜(GPC)、凝膠過濾色譜(GFC)和分子排阻色譜(MEC)。主要用于分離蛋白質(zhì)等大分子化合物。

3其他無機填料塔

這種色譜柱僅限于特殊應(yīng)用，主要包括石墨化碳、氧化鋁(Al2O3)、氧化鋯(ZrO2)等填料。不需要表面修飾，自身表面可以強烈保留各種化合物。它可以在任何酸堿度(氧化鋁除外，不超過12.0)和高溫(高達100℃)下使用。其中，石墨化碳填充柱可以分離多種化合物，主要用于分離幾何異構(gòu)體；氧化鋁柱剛性強，床層穩(wěn)定，可分離多種化合物，多用于制備色譜；氧化鋯柱比氧化鋁柱具有更強的酸堿度范圍和更高的耐受溫度，但其應(yīng)用有待進一步研究。

4創(chuàng)建一個列文件

色譜柱檔案作為色譜儀器檔案應(yīng)受到重視，主要內(nèi)容包括:品牌、型號、序列號、購買日期、購買發(fā)票、使用記錄(使用日期、使用人、使用目的、使用狀況)、維護記錄(老化時間、老化人、故障現(xiàn)象、故障原因、處理方法、處理結(jié)果、圖紙)等。，應(yīng)該以文件框的形式保存，最好專門用于特殊的列。

(4)液相色譜柱的應(yīng)用范圍和特點

1個反相色譜柱

2個正相色譜柱

3聚合物基質(zhì)柱

分離式聚苯乙烯填料塔主要用于分離蛋白質(zhì)等大分子化合物，主要用于凝膠滲透色譜、GFC、MEC等。如果與離子交換基團鍵合，就形成了分離酸性化合物(磺酸基)、堿性化合物(季銨基)和藥物代謝物的離子交換柱。特點:在1 < pH < 13的流動相中穩(wěn)定；分離峰形狀更好，柱壽命更長。

4其他無機填料塔

如氧化鋁、石墨化碳、氧化鋯、硅藻土等。，主要用于制備色譜。

(5)液相色譜柱的分離機理

(六)液相色譜柱制備過程簡述

不同品牌的色譜柱制備工藝不同，但可以總結(jié)如下(以硅膠柱為例):

硅烷化硅膠的制備(四乙氧基硅烷脫乙基和聚合)→Si-OH基團的暴露(脫乙基和用H置換)→海綿狀多孔硅膠的構(gòu)建(物理均化過程)→官能團鍵合(各種官能團與Si-OH的鍵合)→端基封閉(殘留Si-OH與小分子氯-甲基和氯-乙基的鍵合)→潤濕混合(加入乙醇等)。所有廠家對其配方都有專利保護)→灌裝(機械灌裝或人工灌裝，逐層灌裝，壓實潤濕)→高壓平衡(軸向壓制或徑向壓制，所有廠家都有專利保護)→干燥(此步驟是關(guān)鍵工藝步驟，所有廠家都有專利保護)→壓扁→組件安裝→預(yù)平衡→柱效測試流動相平衡→柱效測試→密封→包裝