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0歲的嬰兒尿流式做不出結(jié)果專題之IVD知識(shí)文庫(kù)系列-11.14微生物檢測(cè)の泌尿生殖道病毒

編者按:

本次章節(jié)新增篇章,為泌尿-生殖道病毒篇章。包含了:泌尿-生殖道病毒相關(guān)的知識(shí)點(diǎn)。

關(guān)鍵詞:泌尿-生殖道病毒。

其意義在于概括了解泌尿-生殖道病毒及市場(chǎng)。

泌尿生殖道感染及病毒性皮膚病

泌尿-生殖道感染

泌尿生殖系統(tǒng)感染是致病微生物侵入泌尿生殖系統(tǒng)而引起的炎癥反應(yīng),一般指普通致病菌引起的非特異感染,是泌尿外科最常見(jiàn)疾病之一。

泌尿系統(tǒng)感染通常稱尿路感染,根據(jù)感染的部位分為:

上尿路感染:累及腎、腎盂及輸尿管。

下尿路感染:累及膀胱和尿道。

非特異性致病菌占70%左右,以G—桿菌為主,最常見(jiàn)的為大腸埃希菌,約占50%。其他為腸桿菌屬、變形菌、克雷白菌、沙門菌、銅綠假單胞菌等。

G+菌引起的感染約15%,包括葡萄球菌(金黃色葡萄球菌,表皮葡萄球菌)、鏈球菌、糞鏈球菌等。其他。

特異性致病菌主要為結(jié)核桿菌和淋球菌等。

性傳播性疾病

指通過(guò)性行為或類似性行為傳染的一組傳染病。

我國(guó)需傳報(bào)的有8種性?。毫懿?、艾滋病、梅毒 –非淋菌性尿道炎、尖銳濕疣、軟下疳、性病性肉芽腫、生殖器皰疹。

病毒性皮膚病

病毒可引起全身性傳染性疾病,只有一小部分以皮膚、黏膜病變?yōu)橹鳌?/p>

臨床上根據(jù)其核酸的組成分為:

DNA病毒

RNA病毒

病毒性皮膚病主要由 DNA病毒引起。

病毒感染可通過(guò)三種方式侵犯皮膚:

① 直接感染:如疣病毒、傳染性軟疣病毒、原發(fā)性單純皰疹是通過(guò)直接感染,在表皮內(nèi)以復(fù)制的方式而發(fā)病。

② 系統(tǒng)感染:指在病毒血癥期間感染皮膚,如水痘、麻疹、風(fēng)疹等。

③ 從體內(nèi)局部擴(kuò)散:復(fù)發(fā)性單純皰疹、帶狀皰疹是由外周神經(jīng)潛伏的病毒因活躍而擴(kuò)散至局部皮膚而發(fā)病。

病毒性皮膚病臨床表現(xiàn)分為三型:

① 皰疹型 如單純皰疹、水痘、帶狀皰疹等;

② 紅斑發(fā)疹型 如麻疹、風(fēng)疹等;

③ 新生物型 如各種疣等;

近來(lái)對(duì)病毒性皮膚病,皆以所致皮膚病的病毒種類來(lái)進(jìn)行分類?,F(xiàn)歸納如下:

(一)DNA病毒

1.皰疹病毒組

(1) 單純皰疹病毒 單純皰疹、Kaposi水痘樣疹。

(2) 水痘-帶狀皰疹病毒 水痘、帶狀皰疹。

(3) 巨細(xì)胞病毒 巨細(xì)胞包涵體病。

(4) 人類皰疹病毒4型(EB病毒) 傳染性單核細(xì)胞增多癥、慢性EB病毒引起的環(huán)狀肉芽腫樣皮疹。

(5) 人類皰疹病毒6型 幼兒急疹。

(6) 猿皰疹病毒(B病毒) B病毒病。

2.痘病毒組

(1) 天花病毒 天花、種痘反應(yīng)、牛型痘、牛痘樣濕疹。

(2) 副牛痘病毒 擠奶人結(jié)節(jié)、羊痘。

(3) 傳染性軟疣病毒 傳染性軟疣。

(4) 猴天花病毒 猴天花病毒病、yaba猴病毒病。

3.乳頭多瘤空泡病毒

尋常疣、

扁平疣、

跖疣、

尖銳濕疣、

疣狀表皮發(fā)育不良、

鮑溫樣丘疹病、

口腔灶性上皮增生。

4.肝炎病毒所致的皮膚病

小兒丘疹性肢端皮炎、

乙型肝炎抗原血癥、

A型肝炎、丙型肝炎病毒感染皮膚表現(xiàn)。

(二)RNA病毒

1.副粘病毒

(1) 麻疹病毒 麻疹、非典型麻疹綜合征。

(2) 風(fēng)疹病毒 風(fēng)疹、風(fēng)疹綜合征。

(3) 呼吸道融合病毒 呼吸道融合病毒感染癥。

2.小RNA病毒

(1) 柯薩奇(Coxsackie)病毒 皰疹性咽峽炎,手、足、口病,口蹄疫,柯薩奇濕疹,柯薩奇病毒疹。

(2) ???ECHO)病毒 埃可病毒疹。

3.蟲媒病毒 登革熱、西尼羅河熱、白蛉熱、綠猴病、病毒性出血熱。

4. 腺病毒 腺病毒疹。

5.細(xì)小病毒 傳染性紅斑。

(三)可能由病毒引起的皮膚病

急性發(fā)熱性皮膚粘膜淋巴結(jié)綜合征(川崎病 )、Duke病。

常見(jiàn)的泌尿生殖道疾病及檢測(cè)

一、生殖器皰疹

1)由單純皰疹病毒感染泌尿生殖器及肛門部位皮膚粘膜引起,即HSV-1 和HSV-2。

HSV是雙鏈DNA病毒,屬于人類皰疹病毒α亞科,人類是HSV的唯一自然宿主 v病毒顆粒直徑約150nm,其中央為病毒核心,含有病毒基因組DNA 。

病毒具有嗜感覺(jué)神經(jīng)節(jié)而形成潛伏感染狀態(tài)的特性。

潛伏部位:骶神經(jīng)根區(qū)。

臨床表現(xiàn)多樣

典型:集簇性水皰、膿皰、潰瘍及結(jié)痂。

不典型:非特異性紅斑、丘疹、裂隙、硬結(jié)、毛囊炎、皮膚擦破、紅腫滲液性包皮龜頭炎。

并發(fā)癥

中樞神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥:無(wú)菌性腦膜炎、自主神經(jīng)功能障礙、橫斷性脊髓炎和骶神經(jīng)根病。

皰疹性腦膜腦炎:發(fā)熱、頭痛、嘔吐、畏光和頸項(xiàng)強(qiáng)直。

播散性HSV感染:皮膚感染、腦膜炎、肝炎、肺炎、關(guān)節(jié)炎等。

實(shí)驗(yàn)室檢查

1.培養(yǎng)法:細(xì)胞培養(yǎng)HSV陽(yáng)性。是HSV檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn),敏感、特異。驗(yàn)室要求較高,需要的時(shí)間長(zhǎng)。適合參比室開(kāi)展。

2.細(xì)胞學(xué)檢查:查見(jiàn)多核巨細(xì)胞和核內(nèi)包涵體敏感性和特異性差。

3.抗原檢測(cè):直接免疫熒光試驗(yàn)、流式熒光法、免疫酶染色和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)敏感性是病毒分離培養(yǎng)法的70%-90%方法簡(jiǎn)單,是現(xiàn)在臨床HSV常用的的檢測(cè)方法。

4.HSV-DNA或基因檢測(cè)法:PCR的敏感性和特異性高操作復(fù)雜,實(shí)驗(yàn)要求較高,要防止污染而出現(xiàn)假陽(yáng)性。

中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

即生殖器皰疹診斷標(biāo)準(zhǔn)

二.人類乳頭瘤病毒感染

由人類乳頭瘤病毒(Human papilloma virus ,HPV)感染引起的皮膚或粘膜上皮增生物。 迄今,已有80余種HPV類型被確定

HPV類型與臨床表現(xiàn)具有相關(guān)性,可形成潛伏感染、亞臨床感染、各種疣、良性腫瘤或惡性腫瘤。

實(shí)驗(yàn)室檢查

1.培養(yǎng)法:細(xì)胞培養(yǎng)HPV陽(yáng)性。是HPV檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn),敏感、特異。驗(yàn)室要求較高,需要的時(shí)間長(zhǎng)。適合參比室開(kāi)展。

2.細(xì)胞學(xué)檢查:角化不全、空泡細(xì)胞 、透明角質(zhì)顆粒濃染增多。

3.抗原檢測(cè):直接免疫熒光試驗(yàn)、流式熒光法、免疫酶染色和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。

4.HPV-DNA或基因檢測(cè)法:PCR的敏感性和特異性高操作復(fù)雜,實(shí)驗(yàn)要求較高,要防止污染而出現(xiàn)假陽(yáng)性,是現(xiàn)在臨床HPV常用的的檢測(cè)方法。

三.帶狀皰疹

帶狀皰疹是由水痘-帶狀皰疹病毒(VZV)所引起的,以沿單側(cè)周圍神經(jīng)分布的簇集性小水皰為特征的,常伴有神經(jīng)痛的急性皰疹性皮膚病。

本病常突然發(fā)生,表現(xiàn)為成群的密集性小水皰,沿一側(cè)周圍神經(jīng)作帶狀分布,常伴有神經(jīng)痛和局部淋巴結(jié)腫痛,愈后極少?gòu)?fù)發(fā)。

本癥多好發(fā)于春秋季節(jié)。多見(jiàn)于成人,兒童較少見(jiàn)。與水痘的流行規(guī)律不同,本病常呈散發(fā)性。

實(shí)驗(yàn)室檢查

半數(shù)患者白細(xì)胞總數(shù)在5×109/L以下,白細(xì)胞偏低的患者在好轉(zhuǎn)期或痊愈后可以恢復(fù)正常。胸段帶狀皰疹宜作x線透視或攝片,因1/3以上病例可發(fā)現(xiàn)結(jié)核等肺部病變。腦脊液檢查少數(shù)患者可有蛋白增高及白細(xì)胞增多。

1.培養(yǎng)法:細(xì)胞培養(yǎng)HZV陽(yáng)性。是HZV檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn),敏感、特異。驗(yàn)室要求較高,需要的時(shí)間長(zhǎng)。適合參比室開(kāi)展。

2.細(xì)胞學(xué)檢查:本病根據(jù)典型臨床表現(xiàn)即可作出診斷,皰底刮取物涂片找到多核巨細(xì)胞和核內(nèi)包涵體有助于診斷。

3.抗原檢測(cè):直接免疫熒光試驗(yàn)、流式熒光法、免疫酶染色和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。

4.HZV-DNA或基因檢測(cè)法:PCR的敏感性和特異性高操作復(fù)雜,實(shí)驗(yàn)要求較高,要防止污染而出現(xiàn)假陽(yáng)性,是現(xiàn)在臨床HZV常用的的檢測(cè)方法。

泌尿生殖道標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢查

常見(jiàn)標(biāo)本的處理

女性:

尿道分泌物拭子:NG

陰道分泌物拭子:NG

白帶:念珠菌,陰道加德納菌

動(dòng)彎曲菌,毛滴蟲

宮頸分泌物拭子(內(nèi)膜除外):NG

男性:

尿道分泌物拭子(診斷未明):腸道細(xì)菌,NG

對(duì)于生殖器支原體來(lái)說(shuō),溶脲脲原體和人型支原體可以從泌尿生殖道分離到。

對(duì)于男性,常送檢尿道試子。

女性則用陰道,宮頸或尿道拭子送檢,盡管柔膜體綱并不經(jīng)常與陰道炎相關(guān)。

尿液需要送檢和分析,但其微生物的產(chǎn)量比試子的低。

常見(jiàn)消化道病毒檢測(cè)方法

(一)病毒分離培養(yǎng)

利用組織培養(yǎng)技術(shù)從感染部位或傳染源分離出病毒并鑒定其特異性血清型是病毒性疾病診斷的金標(biāo)準(zhǔn)。

病人尿液或生殖道分泌物標(biāo)本是最常采集的標(biāo)本。

TAT時(shí)間≥1周

(二)病原學(xué)相關(guān)檢查

血清學(xué)鑒定:

利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)( ELISA) 捕捉法或間接法檢測(cè)早期病人血清中的IgM 和I gG 抗體, 是較常用的檢測(cè)指標(biāo)。

此方法在檢測(cè)中不適用于早期診斷, 可作為回顧性診斷。

PCR 技術(shù):

PCR 可檢出幾乎所有各類型泌尿生殖道病毒血清型。

EV- PCR 一般可在收到標(biāo)本后5~ 24h 內(nèi)提供診斷結(jié)果, 是目前較理想的診斷技術(shù)。

PCR 從腦脊液、血、尿、糞、咽拭標(biāo)本中檢出腸道病毒, 其靈敏度達(dá)88% ~ 100%, 特異性為83% ~97%。

熒光實(shí)時(shí)定量PCR 應(yīng)用與靶序列直接結(jié)合的熒光探針可將生成的RNA 加以定量, 其特點(diǎn)為檢測(cè)快速( 從樣品準(zhǔn)備到數(shù)據(jù)分析只有3 h) 、敏感性強(qiáng)、擴(kuò)增產(chǎn)物可直接定量、密閉系統(tǒng)防止交叉污染等, 這些優(yōu)點(diǎn)奠定了其在腸道病毒檢測(cè)中的應(yīng)用空間。

使用TaqMan PCR 具有自動(dòng)化、易標(biāo)準(zhǔn)化的特點(diǎn), 使其可能成為病毒檢測(cè)中組織培養(yǎng)的替代方法。

病毒檢測(cè)方法學(xué)對(duì)比及注意事項(xiàng)

機(jī)體產(chǎn)生IgM一般需要一周左右的時(shí)間,而有免疫缺陷或免疫系統(tǒng)不健全的個(gè)體如兒童,特別是3歲以下的小孩,其產(chǎn)生抗體往往需要更久,且抗體產(chǎn)生的水平也較低。

若檢測(cè)的是IgG,則不能很好地區(qū)分既往感染和急性感染。

因此,抗原檢測(cè)的方法對(duì)嬰幼兒和兒童的呼吸道感染的病因診斷、鑒別診斷和臨床用藥指導(dǎo)比抗體法更有優(yōu)勢(shì)檢測(cè)抗體IgM比IgG更有臨床意義。

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