醌是一種強(qiáng)氧化劑。在酸性溶液中，碘離子將氫醌定量還原為氫醌。釋放的當(dāng)量碘可以通過比色法測定，淀粉呈藍(lán)色。

D2.2儀器和設(shè)備

721或類似的分光光度計(jì)和2厘米比色池、恒溫水浴、50毫升容量瓶、2毫升、5毫升和10毫升刻度吸管。

D2.3試劑

D2.3.1 0.1N溴酸鉀-溴化鉀溶液:稱取2.8g溴酸鉀和4.0g溴化鉀，用蒸餾水稀釋至1L。

D2.3.2 1: 1磷酸:向磷酸中加入一倍的蒸餾水。

D2.3.3飽和氯化鈉溶液:稱取40克氯化鈉，溶于100毫升蒸餾水中。

D2.3.4 20%溴化鉀溶液:稱取20克溴化鉀，溶于100毫升蒸餾水中。

D2.3.5 5%苯酚溶液:取5mL苯酚，溶于100mL蒸餾水中。

D2.3.6 5%碘化鉀溶液:稱取5克碘化鉀，溶于100毫升蒸餾水中。(使用時(shí)準(zhǔn)備，放在暗處)

D2.3.7 0.2%淀粉溶液:稱取1g可溶性淀粉，加入少量水，攪拌均勻，倒入沸騰的500mL水中，繼續(xù)煮沸5min。夏季可添加0.2g水楊酸。

D2.3.8標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備:準(zhǔn)確稱取0.276g氫醌(分子量:110.11g)、0.861g照相級25mL Tuer(分子量:344.40g)、0.656g照相級TSS(分子量:262.33g)(或根據(jù)所用藥物的分子量和純度分別計(jì)算)此溶液的濃度為0.010m m。

D2.4步驟

D2.4.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

D2.4.1.1取25毫升標(biāo)準(zhǔn)溶液，用蒸餾水稀釋至1000毫升。該溶液濃度為0.00025M，即每毫升含氫醌0.25μmol(溶液A)。

D2.4.1.2取25毫升溶液a，用蒸餾水稀釋至250毫升。該溶液的濃度為0.000025M，即每毫升含氫醌0.25 μmol(溶液b)。

D2.4.1.3取6個(gè)50mL容量瓶，分別加入標(biāo)準(zhǔn)稀釋液(溶液b)0；0.1;0.2;0.3;0.4;0.5 μmol氫醌(即4.0；8.0;12.0;16.0;20.0毫升溶液b)，加入適量蒸餾水，使每只容量瓶約為20毫升溶液。

D2.4.1.4通過刻度吸管加入2mL 1:1磷酸。

D2.4.1.5用吸管吸取5mL飽和氯化鈉溶液。

D2.4.1.6用吸管取2mL 0.1N溴酸鉀-溴化鉀溶液，盡量不要粘瓶壁。用很少的水沖洗瓶壁，搖勻。溶液應(yīng)為淡黃色，含溴化氯。放入35℃恒溫水浴鍋中15分鐘。

D2.4.1.7吸收2mL 20%溴化鉀溶液，并沿瓶壁周邊將其加入容量瓶。搖勻后放入35℃水浴中5 ~ 10分鐘。

D2.4.1.8用滴管快速加入1毫升5%苯酚溶液，并立即搖勻，使溴的顏色逐漸消失。(如果添加緩慢，容易形成白色沉淀，無法進(jìn)行顏色對比)。

D2.4.1.9冷卻:放入自來水中3min。

D2.4.1.10通過吸管加入2mL新制備的5%碘化鉀溶液，沖洗瓶壁；放在黑暗的柜子里5分鐘。

D2.4.1.11吸收10毫升0.2%淀粉指數(shù)劑，加入容量瓶中，用蒸餾水加入刻度，蓋上蓋子，搖勻，放入暗箱中20分鐘。

D2.4.1.12將顯色試驗(yàn)溶液放入2厘米的比色池中，在分光光度計(jì)570納米處，用試劑空白色為0測量五種溶液的光密度，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。橫坐標(biāo)為0.1、0.2、0.3、0.4、0.5μmo/50mL。

D2.4.2水樣的測定

取適量水樣(約1 ~ 10 ml)放入50mL容量瓶中，加入蒸餾水至20mL左右，在另一個(gè)50mL容量瓶中加入20mL蒸餾水作為試劑空白色。按照步驟D2.4.1.11 ~D2.4.1.12測量水樣的光密度，在曲線上找出50mL內(nèi)的微克分子數(shù)。

D2.4.3待消除干擾的水樣測定

當(dāng)水樣中含有影響測定的六價(jià)鉻離子時(shí)，可用NaNO2將Cr6+還原為Cr3+，用過量的尿素可以消除過量的NaNO2對本實(shí)驗(yàn)的干擾。

準(zhǔn)確取適量水樣(約1 ~ 10毫升)，放入50毫升容量瓶中，加入蒸餾水至20毫升左右，加入2毫升1: 1磷酸，然后加入3滴10% nano2，充分振蕩，置于35℃恒溫水浴中15分鐘。然后加入2mL 20%尿素，充分搖勻，放入35℃水浴中10分鐘。按照步驟D2.4.1.5~D2.4.1.12進(jìn)行以下操作，測量光密度，在曲線上找到50mL所含的微克分子數(shù)。

D2.5計(jì)算

水樣c中顯影劑和氧化物的總量(以對苯二酚計(jì))根據(jù)公式(D2)計(jì)算:

c(毫克/升)= 50毫升x110/取樣體積(毫升)x 1000中的微摩爾數(shù)(D2)

D2.6注意事項(xiàng)

D2.6.1本測試步驟多，時(shí)間長，需要謹(jǐn)慎操作。

D2.6.2使用的玻璃器皿必須用清洗液清洗。

D2.6.3水浴溫度應(yīng)精確到35℃±1℃，各步反應(yīng)時(shí)間應(yīng)精確控制。

D2.6.4加入溴酸鉀-溴化鉀后，必須用蒸餾水沖洗容量瓶壁，否則殘留的溴酸鉀會(huì)與碘化鉀反應(yīng)生成碘，增加光密度。

D2.6.5在不含鉻離子的廢水中，水樣可以不經(jīng)處理直接測定。

D2.6.6如果水樣太稠，事先稀釋后再測量。

D3-磷鉬藍(lán)比色法測定元素磷

D3.1原則

元素磷經(jīng)苯萃取后氧化形成的鉬磷，經(jīng)氯化亞錫還原為藍(lán)鉻化合物。靈敏度高于釩鉬磷酸比色法，易于富集。富集后，當(dāng)元素磷含量小于0.1毫克/升時(shí)，可提高檢測的可靠性，減少干擾。

當(dāng)水樣中砷、硅化物和硫的含量分別是元素磷的100倍、200倍和300倍時(shí)，對該方法沒有明顯的干擾。

D3.2儀器和試劑

D3.2.1儀器:分光光度計(jì):3厘米比色皿。

D3.2.2比色管:50mL。

D3.2.3分液漏斗瓶:60毫升、125毫升和250毫升。

D3.2.4研磨錐形瓶:250毫升。

D3.2.5試劑:下列試劑為分析純:苯、高氯酸、溴酸鉀、溴化鉀、甘油、氯化亞錫、鉬酸銨、磷酸二氫鉀、乙酸丁酯、硫酸、硝酸、無水乙醇、酚酞指示劑。

D3.3溶液的制備

D3.3.1磷酸二氫鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液:準(zhǔn)確稱取0.4394g干燥的磷酸二氫鉀，溶于少量水中，移入1000mL容量瓶中，定容。此解決方案{ display style po _ { 4 } {-3 }-p } { display style po _ { 4 } {-3 }-p }的含量為0.1mg/mL。將10毫升上述溶液放入1000毫升容量瓶中，定容，得到{ display style po _ { 4 } {-3 }-p } { display style po _ { 4 } {-3 }-p }含量為1微克/毫升的磷酸二氫鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液。

D3.3.2溴酸鉀-溴化鉀溶液:將10g溴酸鉀和8g溴化鉀溶于400mL水中。

D3.3.3 2.5%鉬酸銨溶液:稱取2.5g鉬酸銨，加入70mL 1: 1硫酸溶液，鉬酸銨溶解后加入30mL水。

D3.3.4 2.5%氯化亞錫甘油溶液:將2.5克氯化亞錫溶解在100毫升甘油中(可在水浴中加熱以促進(jìn)溶解)。

D3.3.5 5%鉬酸銨溶液:將12.5克鉬酸銨溶于150毫升水中，然后將該溶液緩慢倒入100毫升1: 5硝酸溶液中。

D3.3.6 1%氯化亞錫溶液:將1克氯化亞錫溶于15毫升鹽酸中，加入85毫升水和1.5克抗壞血酸(可儲存4 ~ 5天)。

D3.3.7 1:1硫酸溶液、1:5硝酸溶液和20%氫氧化鈉溶液。

D3.4確定步驟

D3.4.1當(dāng)廢水中元素磷含量大于0.05mg/L時(shí)，應(yīng)采用水相直接比色，并遵循以下規(guī)定。

D3.4.1.1水樣的預(yù)處理

a)萃取:將10 ~ 100毫升水樣放入裝有25毫升苯的125毫升或250毫升分液漏斗中，振蕩5分鐘，然后靜置分層。將水相轉(zhuǎn)移到另一個(gè)含15毫升苯的分液漏斗中，搖動(dòng)2分鐘，然后靜置，棄去水相，將苯相合并到第一個(gè)分液漏斗中。加入15毫升水，振蕩1分鐘，然后靜置，棄去水相，重復(fù)洗滌苯相6次。

b)氧化:加入10 ~ 15ml溴酸鉀-溴化鉀溶液，2mL 1: 1硫酸溶液，振蕩5min，然后加入2mL高氯酸，振蕩5min，轉(zhuǎn)移到250mL錐形瓶中，在電熱板上緩慢加熱，驅(qū)除過量高氯酸，去除溴(不要使樣品溢出或蒸發(fā))。當(dāng)白煙減少時(shí)，將其取下并冷卻。加入少量水和1滴酚酞指示劑，用20%氫氧化鈉溶液中和至呈粉紅色，加入1滴1: 1硫酸溶液至粉紅色消失，轉(zhuǎn)入容量瓶，用蒸餾水稀釋至刻度(稀釋體積根據(jù)元素磷含量確定)。

D3.4.1.2顏色比較

將適量的上述稀釋劑轉(zhuǎn)移到50毫升比色管中，加入2毫升2.5%鉬酸銨溶液和6滴2.5%氯化亞錫甘油溶液，加水稀釋至刻度，混合均勻，在20 ~ 30℃放置20 ~ 30分鐘，倒入3厘米的比色皿中，在分光光度計(jì)波長690納米處，以試劑空白色為0測量光度密度

D3.4.1.3直接比色法工作曲線的繪制

a)取適量磷酸二氫鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液，使{ display style po _ { 4 } {-3 }-p } { display style po _ { 4 } {-3 }-p }的含量為0，1，3，5，7...并在50毫升比色管中測量光度密度。

b)以{ display stylepo _ { 4 } {-3 }-p } { display stylepo _ { 4 } {-3 }-p }的含量為橫坐標(biāo)，光密度為縱坐標(biāo)，畫出直接比色工作曲線。

D3.4.2廢水中元素磷含量小于0.05mg/L時(shí)，采用有機(jī)相萃取進(jìn)行比色。按以下規(guī)定執(zhí)行:

D3.4.2.1水樣的預(yù)處理

提取和比色:取適量氧化稀釋液放入60mL分液漏斗中，分液漏斗中裝有3Ml 1:5硝酸溶液，加入7Ml 15%鉬酸銨溶液和10mL乙酸丁酯，振蕩1分鐘，棄去水相，向有機(jī)相中加入2Ml 1%氯化亞錫溶液，搖勻，然后加入1mL無水乙醇，輕輕旋轉(zhuǎn)分液漏斗使水滴下，將水相完全瀝干，將有機(jī)相倒入3cm比色皿中。

D3.4.2.2有機(jī)相萃取比色工作曲線的繪制

a)轉(zhuǎn)移適量的磷酸二氫鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液，使{ display style po _ { 4 } {-3 }-p } { display style po _ { 4 } {-3 }-p }的含量分別為1、2、3、4、5μg，向60mL分液漏斗中加入少量的水，然后按上一節(jié)提取并著色

b)以{ display stylepo _ { 4 } {-3 }-p } { display stylepo _ { 4 } {-3 }-p }的含量為橫坐標(biāo)，光密度為縱坐標(biāo)，繪制有機(jī)相萃取的比色工作曲線。

D3.5計(jì)算

用公式(D3)計(jì)算直接比色法和有機(jī)相萃取比色法測定的1L廢水中元素磷的毫克數(shù)。

其中:G——從工作曲線中找到的元素磷含量，μG；

V1——取廢水樣品的體積，ml；

V2——氧化后廢水樣品的稀釋體積，ml；

V3——比色時(shí)的稀釋液體積，毫升。

D3.6精度

平行測量的兩個(gè)結(jié)果之間的差異不應(yīng)超過較小結(jié)果的10%。

兩個(gè)平行測定結(jié)果的算術(shù)平均值作為樣品中元素磷的含量，測定結(jié)果取兩個(gè)有效數(shù)字。

D3.7樣品保存

采樣后，將水樣的pH值調(diào)至6 ~ 7，在塑料瓶或玻璃瓶中保存48小時(shí)。

結(jié)束