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發(fā)光細(xì)菌 發(fā)光細(xì)菌法水質(zhì)急性毒性檢測(cè)的原理與方法

記者張健

水質(zhì)發(fā)光細(xì)菌試驗(yàn)、水質(zhì)急性毒性試驗(yàn)和發(fā)光細(xì)菌試驗(yàn)。隨著時(shí)代的快速發(fā)展,水污染問題也在穩(wěn)步增長(zhǎng)。與此同時(shí),許多敏感而有效的環(huán)境監(jiān)測(cè)方法被開發(fā)出來,這些方法可分為兩類:分析技術(shù)和生物監(jiān)測(cè)。發(fā)光細(xì)菌法作為一種新的生物毒性監(jiān)測(cè)技術(shù),可應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)室條件下工業(yè)廢水、生活廢水和可溶性化學(xué)品的急性毒性監(jiān)測(cè)。

樊菲檢測(cè)一直處于檢測(cè)領(lǐng)域的前沿,積極探索和研究發(fā)光細(xì)菌法,以彌補(bǔ)傳統(tǒng)分析技術(shù)在檢測(cè)生物毒性方面的不足。目前,發(fā)光細(xì)菌法檢測(cè)廢水急性毒性的技術(shù)已經(jīng)非常成熟,可以出具國家認(rèn)可的權(quán)威檢測(cè)報(bào)告。

詳情請(qǐng)致電18721915404與工程師聯(lián)系。

一、發(fā)光細(xì)菌法概述

記者從樊菲試驗(yàn)中了解到,發(fā)光細(xì)菌的相對(duì)發(fā)光度與水樣中有毒成分的總濃度呈顯著負(fù)相關(guān)。0.05),所以水樣的相對(duì)光度可以用生物發(fā)光光度計(jì)測(cè)定,可以用來表示其急性毒性水平。

根據(jù)8中描述的條件,水質(zhì)的急性毒性水平的特征在于等效參考毒性氯化汞濃度(單位為毫克/升)或ECSO值(半有效濃度-樣品溶液的百分比濃度)。

二、發(fā)光細(xì)菌法的原理

樊菲檢測(cè)工程師還向記者詳細(xì)介紹了發(fā)光細(xì)菌法的原理:發(fā)光細(xì)菌是一種非致病性革蘭氏陰性兼性厭氧菌,最適溫度為20 ~ 30℃,pH為6 ~ 9,NACL濃度為3%,在正常生理?xiàng)l件下可發(fā)出可見熒光。這種可見熒光的波長(zhǎng)在450~490 nm之間,在黑暗中肉眼可見。發(fā)光細(xì)菌法利用靈敏的光電測(cè)量系統(tǒng)測(cè)量毒物,毒物的毒性可用EC50表示,即發(fā)光細(xì)菌發(fā)光強(qiáng)度降低50%時(shí)毒物的濃度。發(fā)光細(xì)菌含有熒光素、熒光素酶、ATP等發(fā)光元素,在有氧條件下通過細(xì)胞內(nèi)生化反應(yīng)產(chǎn)生微弱熒光。

當(dāng)細(xì)胞活性增加,處于活躍分裂狀態(tài)時(shí),其ATP含量高,發(fā)光強(qiáng)度增強(qiáng)。在毒物的作用下,發(fā)光細(xì)菌的細(xì)胞活性和ATP含量降低,導(dǎo)致發(fā)光細(xì)菌發(fā)光強(qiáng)度降低。實(shí)驗(yàn)表明,毒物濃度與細(xì)菌發(fā)光強(qiáng)度呈線性負(fù)相關(guān)。因此,可以根據(jù)發(fā)光細(xì)菌的發(fā)光強(qiáng)度來判斷毒物的毒性,用發(fā)光強(qiáng)度來表征毒物所在環(huán)境的急性毒性。該方法是20世紀(jì)70年代末提出的一種新的微生物監(jiān)測(cè)方法,因其靈敏、快速、簡(jiǎn)單、成本低而獨(dú)具特色。

三、發(fā)光細(xì)菌法測(cè)定方法

(1)新鮮發(fā)光細(xì)菌培養(yǎng)物的測(cè)定

將發(fā)光細(xì)菌接種到液體發(fā)光培養(yǎng)基中,在適當(dāng)?shù)臈l件下(約20℃)通氣培養(yǎng)12小時(shí)(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期)。用緩沖液稀釋至合適的細(xì)菌濃度后,加入試管中,與供試品溶液混合10-20分鐘,讀出樣品管和對(duì)照管的光強(qiáng)。

(2)發(fā)光細(xì)菌和藻類的混合測(cè)定

有些毒物對(duì)發(fā)光細(xì)菌沒有直接毒性作用,但對(duì)藻類有毒性作用。根據(jù)這一特點(diǎn),將培養(yǎng)好的發(fā)光菌懸液和藻類懸液混合,加入試管中,與供試品溶液混合。光照一段時(shí)間后,測(cè)量發(fā)光細(xì)菌的光強(qiáng)變化。由于對(duì)藻類的毒害,藻類的光合作用受到干擾,其釋氧能力隨機(jī)下降。因此,發(fā)光細(xì)菌的發(fā)光強(qiáng)度可以根據(jù)光合作用釋放的氧氣來引起。

(3)發(fā)光細(xì)菌凍干制劑的測(cè)定

對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期培養(yǎng)的發(fā)光細(xì)菌制成干粉,用特殊方法保存在冰箱中。使用時(shí)取出加入緩沖液保溫平衡5-10分鐘,使其恢復(fù)到原來的生理狀態(tài)和發(fā)光水平,然后用于檢測(cè)。具有生理狀態(tài)一致、對(duì)毒物敏感性一致、易于定量測(cè)定、結(jié)果重復(fù)性和可比性好、操作簡(jiǎn)單、可長(zhǎng)期保存等特點(diǎn),將是該技術(shù)的發(fā)展方向。

四.報(bào)告內(nèi)容摘要

4.1實(shí)驗(yàn)室室溫

4.2取樣地點(diǎn)、日期和時(shí)間

4.3氯化汞濃度或樣品稀釋百分比濃度與相對(duì)光度之間的相關(guān)方程

4.5樣品的EC50值

4.6測(cè)量器和裝置

水質(zhì)發(fā)光細(xì)菌試驗(yàn)、水質(zhì)急性毒性試驗(yàn)和發(fā)光細(xì)菌試驗(yàn)。樊菲檢測(cè)一直處于檢測(cè)領(lǐng)域的前沿,積極探索和研究發(fā)光細(xì)菌法,以彌補(bǔ)傳統(tǒng)分析技術(shù)在檢測(cè)生物毒性方面的不足。目前,發(fā)光細(xì)菌法檢測(cè)廢水急性毒性的技術(shù)已經(jīng)非常成熟,可以出具國家認(rèn)可的權(quán)威檢測(cè)報(bào)告。

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