移液器在實(shí)驗(yàn)室里是不可缺少的,但是重復(fù)操作難免出錯。因此,優(yōu)秀的實(shí)驗(yàn)者從正確使用移液器開始。
移液器使用技巧
移液器是實(shí)驗(yàn)操作中不可缺少的工具。對于頂尖專家來說,重要的是實(shí)驗(yàn)誤差最小,重復(fù)性好,所以要注意移液器的正確使用。
1.影響移液槍精度的因素
(1)溫度:室溫低時手溫高,使空氣體膨脹,吸入冷溶液時常出現(xiàn)錯誤。
(2)氣密性:槍尖與槍體的連接處和槍內(nèi)的氣缸長期磨損,造成誤差
(3)抽吸速度:容易造成尖端氣泡,污染槍頭
(4)試劑揮發(fā):吸收高揮發(fā)性試劑時,蒸汽進(jìn)入槍頭,內(nèi)壓增大。結(jié)果,當(dāng)液體被壓出時,壓力增加,導(dǎo)致誤差。解決方法:反復(fù)吸4-5次即可改善。
2.具體用法
變尖法:最準(zhǔn)。
(1)將旋鈕調(diào)節(jié)到所需的刻度位置。提示:先稍微超過,然后擺動到音階。注意禁止超過最大刻度,避免人為失誤。
(2)插尖:無菌操作時,注意動作要迅速正確,不要用手觸摸尖,動作的力度要保持一致,禁止無用的動作。正常操作時,可以用拇指和食指擰緊,但不能用手觸摸鼻尖。
(3)手指按壓第一部分,針尖接觸試劑。白尖達(dá)到液面1 mm,黃尖2-3 mm,藍(lán)尖2-4 mm,以避免液壓引起的誤差。
(4)慢慢吸取試劑,禁止液體過快進(jìn)入槍頭。
(5)尖端取出后,輕輕靠在容器內(nèi)壁上,使尖端外壁上的液體向下流動。
(6)將吸頭貼在目標(biāo)容器內(nèi)壁上,輕輕壓向第一段,將液體壓出。
(7)尖端尖端在容器內(nèi)壁上輕微滑動,在尖端保持少量液體,移出目標(biāo)容器,用手指移除尖端,并注意不要溢出試劑。
一尖分開注射:不適用于揮發(fā)性和毒性試劑。
(1)用上述(1)-(4)的方法,移去液面后,先慢慢壓到第一段,再用力壓到第二段,將試劑完全壓出。
(2)如上述(3)所示,慢慢吸出液體。
(3)將試劑壓出至目標(biāo)容器液體空上的第二階段。注意與A壓力相同,注意試劑不要四處飛濺。
(4)慢慢回到第一段,重復(fù)以上操作。達(dá)到目標(biāo)容器原液體不污染針尖的目的。
轉(zhuǎn)移幾微升有價(jià)值試劑的方法:
(1)用上述(1)-(4)的方法,去掉液面后,在容器內(nèi)壁輕壓幾下,使外壁的液體流下。最重要的是白尖低于1 mm。
(2)將tip的尖端浸入目標(biāo)容器的液面下,慢慢壓到第一階段。
(3)松開,回到第一階段,再次吸入液體,重復(fù)4-5次,清洗尖端內(nèi)壁的液體。
(4)將tip的尖端移出液面,輕輕靠在內(nèi)壁上,將液體壓出至第二級。
移液卦
1.安裝吸頭
用力按下移液管套筒的手柄,如有必要,輕輕旋轉(zhuǎn)。
操作錯誤:用力打梢。這種方法會對吸頭造成損壞,甚至?xí)p移液器手柄,從而影響其密封性能。
2.裝定距離
操作前請選擇正確的移液器。移液器可以在10-100%的范圍內(nèi)操作,但在10%的范圍內(nèi)操作需要很高的移液技能,因此建議在35-100%的范圍內(nèi)操作。
范圍調(diào)整:從小范圍調(diào)整到大范圍時,向所需范圍的方向連續(xù)旋轉(zhuǎn),旋轉(zhuǎn)到超過所需范圍1/3的位置,再回到所需范圍。從大范圍調(diào)整到小范圍時,直接相干旋轉(zhuǎn)到需要的范圍。
跑步和洗漱
使用相同的樣品重復(fù)抽吸和引流兩到三次,并在將來為每次抽吸提供相同的接觸面,以確保操作的一致性。
注意:請勿用高溫或低溫液體沖洗!
4.吸頭浸入角度
吸液時盡量保持垂直狀態(tài),傾斜角不應(yīng)超過20°。
5.吸頭浸入深度
6.吸頭浸入時間
吸取后,在液面保持一秒鐘,然后輕輕取下吸頭,這對于大容量移液器或吸取粘性樣品尤其重要。
7.吸入速度
均勻連貫的移液,控制移液速度,過快會造成噴霧、液體或氣溶膠沖進(jìn)移液器,污染活塞等部件。
8.排液和吹氣
將活塞壓到一檔排出液體,稍停后再壓到二檔吹氣。
有四種方式排放液體:
9.手部溫度
移液器不宜長時間握在手里,最好掛在支架上或掛在手上晾干。
移液器操作失誤及處理
作為液體操作中最常用的手動可調(diào)精密移液器,一些錯誤的操作會給操作本身帶來誤差,一些會對機(jī)器造成損壞,簡要總結(jié)如下:
錯誤:組裝吸頭時,用移液器反復(fù)敲擊吸頭,并將其擰緊
正確:插入吸頭,輕輕左右轉(zhuǎn)動,擰緊吸頭
分析:撞擊會造成移液器內(nèi)部齒輪組合松動,長期操作會影響移液器精度。
錯誤:吸頭與移液器不匹配,影響氣密性
正確:選擇與移液器匹配的吸頭,保證質(zhì)量
分析:吸頭不匹配主要表現(xiàn)為對氣密性的影響。會直接影響移液器的準(zhǔn)確度,通常移液操作會少于設(shè)定量。
錯誤:吸液時,移液器傾斜吸液
正確:垂直抽吸
分析:傾斜狀態(tài)會引起氣壓面的變化。會影響移液精度。
錯誤:當(dāng)吸頭包含未插入的液體時,移液器平放在桌面上
正確:將移液器垂直懸掛在移液器支架上
分析:吸頭含有不插電液體。移液器平放后,液體可能會流入移液器體內(nèi),影響移液器內(nèi)部組件,造成嚴(yán)重?fù)p壞和不良污染。
錯誤:使用大范圍移液器移出少量液體
正確:移液量必須在移液器提供的范圍內(nèi),以滿足不準(zhǔn)確和不準(zhǔn)確的要求
分析:空氣墊是移液器不準(zhǔn)確的主要原因。移液器的選擇應(yīng)該是最大范圍,最接近目標(biāo)液體轉(zhuǎn)移體積的選擇原則。
錯誤:吸收高揮發(fā)性液體
正確:不建議使用普通移液器轉(zhuǎn)移強(qiáng)揮發(fā)性液體
分析:如果必須移除高揮發(fā)性液體,在移液完成后應(yīng)立即拆卸移液管,以蒸發(fā)蒸汽。同時,建議使用外部活塞移液器。
錯誤:吸入速度和排出速度太快
正確:慢吸慢放
分析:對于測量范圍為1mL或更大的移液器,快速抽吸很容易導(dǎo)致液體上沖程。過快的排放會增加液體的殘留量。
移液管打油詩
移液槍是大眾買的,科學(xué)使用。記住它
馬馬虎虎,用爛槍實(shí)驗(yàn)停滯。
在使用槍之前,看一下測量范圍是很重要的
翻范圍。不允許在限制范圍內(nèi)。你可以隨意調(diào)節(jié)
苯酚仿萃取最差。吸槍后,槍頭要打掉
不扔槍頭不說把槍身倒扣更蠢
槍體原本是一只塑料氯仿腐蝕鳥
EB是一種強(qiáng)致癌物。吸的時候應(yīng)該戴手套
你為什么不得意忘形,戴著手套拿著槍
因此,EB在不知情的情況下到處污染并傷害他人
用完范圍并調(diào)整最大值。槍可以持續(xù)很長時間
遵守規(guī)范是一種公共道德和美麗的環(huán)境
(內(nèi)容來源:嘉峪檢測網(wǎng) ) 為了幫助從事分析測試工作的實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員系統(tǒng)地學(xué)習(xí)樣品前處理技術(shù)以及主要處理方法的原理和特點(diǎn),了解不同學(xué)科領(lǐng)域最新的前處理技術(shù)。特有多位名師聯(lián)合編寫的【新書上架】樣品前處理技術(shù)的百科全書來啦!本書既可作為實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員系統(tǒng)學(xué)習(xí)和培訓(xùn)的教材,也是日常工作中可以經(jīng)常查閱的必備參考書。接近
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