細胞消化的新時代——胰蛋白酶溶液
冷凍胰酶的時代已經過去了
細胞消化的方法通常分為酶法,如膠原酶、胰蛋白酶、伏隔核酶、Accutase等。、以及非酶消化液,如乙二胺四乙酸、一氧化氮酶、非酶消化液等。其中胰蛋白酶是胰腺分泌的蛋白水解酶,實驗室常用于貼壁細胞的消化。
胰蛋白酶作用于賴氨酸或精氨酸的C端,在37°C時效率最佳,因此預熱的胰蛋白酶可以加速細胞分離。而傳統(tǒng)的胰蛋白酶溶液會在較高的溫度下自行消化,導致酶活性下降,最終導致無效的細胞分離。因此,傳統(tǒng)的胰蛋白酶溶液必須冷凍并儲存在-20℃
不經冷凍保存的胰蛋白酶
胰蛋白酶溶液是專門設計使用類似于標準胰蛋白酶的方法進行細胞分離,但不需要包裝、冷凍和解凍,因此節(jié)省了大量時間和冰箱空。StableCell胰蛋白酶溶液建議儲存在2-8℃,但研究結果表明,即使儲存在37℃,90%以上的酶活性和性能仍可保持
胰蛋白酶溶液已被證明適用于許多細胞類型,如SKOV-3、DU145、HEK293、16HBE41o-、HL-1和MDCK細胞系等。,并具有與默克標準胰蛋白酶相同的優(yōu)異性能。
特點和優(yōu)勢
1.節(jié)省時間:不需要分裝和反復凍融操作
2.儲存方便:2-8°C儲存,不用的材料可以簡單的存放在冰柜里。
3.卓越的品質:在GMP質量管理體系下生產
儲存在2-8℃的穩(wěn)定細胞仍能保持高活性
穩(wěn)定細胞具有良好的細胞解離效果
干細胞傳代的新突破
與人類多能干細胞(包括胚胎干細胞和誘導多能干細胞)傳代相關的一個常見問題是不希望的自發(fā)細胞分化。沒有人工干預,分化細胞增殖迅速,最終降低干細胞培養(yǎng)的整體質量。
傳統(tǒng)的干細胞解離方案大多使用溫和的解離試劑,如Dispase、Accutase或Accumax。然而,這些傳統(tǒng)方法存在一些缺點,如含有動物源性成分,批次間一致性差,需要ROCK抑制劑等。,并且具有應用局限性,仍然不能解決干細胞傳代的問題。
干細胞傳代試劑是一種專利的無酶、化學定義的干細胞解離試劑,它只選擇性地通過未分化的多能干細胞,避免了人工細胞群體篩選或細胞刮除的步驟,從而在不使用ROCK抑制劑的情況下產生高細胞活性。EZ-LiFT還可以保存高度分化的誘導多能干細胞培養(yǎng)物。
不同解離溶液特性的比較
不同干細胞解離試劑對人誘導多能干細胞形態(tài)的影響
利用EZ-LiFT試劑選擇性分離和傳代未分化細胞人誘導多能干細胞
EZ-LiFT試劑可保存高度分化的人胚胎干細胞/iPSC培養(yǎng)物
細胞消化技能和問題解決
細胞消化是細胞研究實驗室非?;A和關鍵的實驗操作,但要成為專家并不容易。在實際操作過程中,你可能會遇到各種奇妙的問題,所以掌握一些技巧,提前積累經驗是非常重要的。
細胞消化
也就是說,培養(yǎng)分離的細胞,
自然是必不可少的
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